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耐热β-半乳糖苷酶基因在大肠杆菌中的表达及酶学性质研究

2008-10-10分类号:Q786

【作者】龚月生  刘锦妮  王晶  杨明明  袁新宇  
【部门】西北农林科技大学动物科技学院  湖北工业大学生物工程学院  
【摘要】【目的】研究耐热β-半乳糖苷酶基因在大肠杆菌中的表达,并检测其酶学性质,为耐热β-半乳糖苷酶的应用和工业化生产奠定基础。【方法】利用基因工程的原理和方法,将来源于嗜热脂肪芽孢杆菌的耐热β-半乳糖苷酶基因(bgaB)克隆到大肠杆菌pET表达系统(pET-28a(+)),并在大肠杆菌BL21(DE3)中进行表达。将构建的重组菌(pET28a-bgaB)在含硫酸卡那霉素的液体LB培养基中以IPTG为诱导剂,对表达产物的最适反应温度、最适反应时间I、PTG诱导浓度、热稳定性及酶促动力学进行检测。【结果】成功构建了表达载体pET28a-bgaB,并测得耐热β-半乳糖苷酶的最适反应温度为65℃,最适反应时...
【关键词】β-半乳糖苷酶基因  大肠杆菌  酶学性质
【基金】国家重点新产品计划项目(2003ED760039)
【所属期刊栏目】西北农林科技大学学报(自然科学版)
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