能产生多角体的可线性化杆状病毒的构建
2008-11-10分类号:Q78
【部门】江苏大学生命科学研究院 苏州大学生命科学学院
【摘要】【目的】改进用于同源重组研究的制备杆状病毒DNA的方法。【方法】采用PCR方法从BmNPV中扩增出多角体基因,并在其两端引入Bsu36I酶切位点。将此片段克隆入转移载体pBacPAK8中,与线性化的杆状病毒DNA共转染昆虫细胞,获得重组病毒。该病毒能形成多角体,便于纯化,同时可以被Bsu36I酶切。该重组病毒的多角体纯化后被裂解,并提取病毒DNA。病毒DNA经Bsu36I酶切后,与含gfp基因的转移质粒共转染家蚕BmN细胞,在荧光显微镜下观察重组病毒的转染效率。【结果】BmNPV多角体基因克隆入转移载体pBacPAK8中后,与线性化的AcPak6及BmPak6DNA共转染sf细胞及BmN细胞,...
【关键词】昆虫-杆状病毒 表达 BmNPV DNA提取
【基金】江苏大学青年基金(1283000066); 江苏省农林厅“六大人才高峰”基金项目
【所属期刊栏目】中国农业科学
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