产酶溶杆菌OH11菌株几丁质酶基因的克隆与表达
2008-01-30分类号:Q78
【部门】南京农业大学农业部病虫监测与治理重点开放实验室/植物保护学院 南京农业大学农业部病虫监测与治理重点开放实验室/植物保护学院 南京农业大学农业部病虫监测与治理重点开放实验室/植物保护学院 南京农业大学农业部病虫监测与治理重点开放实验室/植物保护学院 江苏南京210095 江苏南京210095 江苏南京210095 江苏南京210095
【摘要】利用PCR方法从产酶溶杆菌OH11菌株中克隆到编码几丁质酶的chiA基因。同源性比较发现,其推测产物与产酶溶杆菌C3菌株和N4-7菌株的ChiA有97%以上的序列一致性。基因经NdeⅠ和XhoⅠ双酶切后连接到含T7启动子的高表达载体pET21a(+)上构建重组质粒pChiA,并转化宿主菌BL21(AI)产生BLChiA表达菌株。经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导后发现,BLChiA菌株产生相对分子质量约为75×103的蛋白质。生物活性试验表明,该蛋白能水解几丁质,在几丁质培养基上产生一透明的水解圈,并对立枯丝核菌菌丝的生长有抑制作用。因此该蛋白具有一定的生物防治作用。
【关键词】产酶溶杆菌OH11菌株 chiA基因 克隆 表达
【基金】国家863计划项目(2006AA10A211); 重大基础研究前期研究专项项目(2005CCA02800)
【所属期刊栏目】南京农业大学学报
文献传递