表达禽流感HA基因的重组马立克氏病病毒的构建
2007-08-28分类号:S852.5
【部门】中国农业大学动物医学院 河北省兽药监察所 中国农业大学动物医学院 北京市农林科学院畜牧兽医研究所 江西农业大学动物医学院 北京市农林科学院畜牧兽医研究所 北京市农林科学院畜牧兽医研究所 北京100094 河北省兽药监察所 河北石家庄050051 河北石家庄050051 北京100094 北京100089 江西南昌330045 北京100089 北京100089
【摘要】本试验首先用RT-PCR方法扩增出H9N2亚型禽流感病的HA基因,大小约1 700 bp,将其克隆到真核表达载体pcDNA中,并将该真核表达载体上的CMV启动子控制的含LacZ和HA基因表达盒克隆入马立克氏病病毒US2基因中,成功的构建了马立克氏病病毒的转移载体。然后,通过脂质体方法转染已感染马立克氏病病毒的鸡胚成纤维细胞(CEF)中,通过蓝斑筛选获得重组病毒。该重组病毒通过PCR方法鉴定证实其基因组中含有完整的HA基因。免疫酶反应和Western-blot证实重组病毒表达了禽流感HA蛋白,表达的HA蛋白具有血凝活性。
【关键词】禽流感病毒 HA基因 重组马立克氏病病毒
【基金】河北省自然科学基金(C2005000654)
【所属期刊栏目】华北农学报
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