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应用RD-PCR技术构建溶藻弧菌的cDNA文库

2007-11-15分类号:S941

【作者】王蓓  吴灶和  简纪常  鲁义善  
【部门】广东海洋大学水产学院广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室暨广东省教育厅水产经济动物病害控制重点实验室  广东海洋大学水产学院广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室暨广东省教育厅水产经济动物病害控制重点实验室  广东海洋大学水产学院广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室暨广东省教育厅水产经济动物病害控制重点实验室  广东海洋大学水产学院广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室暨广东省教育厅水产经济动物病害控制重点实验室 广东湛江 524025  广东湛江 524025  广东湛江 524025  广东湛江 524025
【摘要】应用限制性显示PCR(RD-PCR)技术构建溶藻弧菌poly(A)化mRNA的cDNA文库,筛选,收集巧妙地解决了由于细菌mRNA poly(A)化位点的高度多态性、用常规方法构建原核cDNA文库所遇到的文库大量重复冗余的难题。并进行筛选、收集cDNA片段进行测序,根据测序结果进行生物信息学分析和结果验证。实验结果表明,我们成功地构建了溶藻弧菌poly (A)化mRNA的cDNA文库,获得一百多个基因片段并对其中53个基因片段进行测序分析,获得了如细菌Ⅲ型分泌系统易位蛋白、趋药性传感器、类丝氨酸蛋白酶等毒力相关因子的基因片断。并且在一定程度上证实了poly(A)化在细菌中不是个别和偶然的现象。...
【关键词】溶藻弧菌  cDNA文库  限制性显示PCR
【基金】广东省重大科技专项“海水养殖鱼类重大流行性疾病的诊断;监测;防治技术研究”(A3050302); 广东省重大专项“海水鱼类重大疾病疫苗及快速诊断”(A20401001)
【所属期刊栏目】水产学报
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