普通变形杆菌TWN-3株基因组文库构建及免疫印迹筛选
2007-03-30分类号：S941
【部门】生物资源与生态环境教育部重点实验室 生物资源与生态环境教育部重点实验室 生物资源与生态环境教育部重点实验室 生物资源与生态环境教育部重点实验室 生物资源与生态环境教育部重点实验室 生物资源与生态环境教育部重点实验室 成都通威水产科技有限公司基因实验室 成都通威水产科技有限公司基因实验室 成都通威水产科技有限公司基因实验室 生物资源与生态环境教育部重点实验室 四川大学生命科学学院 成都610064 成都通威水产科技有限公司基因实验室 成都610081 四川大学生命科学学院 成都610064 成都通威水产科技有限公司基因实验室 成都610081 四川大学生命科学学院 成都610064 成都通威水产...
【摘要】在从患病大口鲇中分离到普通变形杆菌TWN-3株的基础上,将该菌总DNA用EcoRI不完全酶切后,分离5kb左右的片段,连接入pUC18质粒,转化E.coli BL21,构建基因组文库,得到3.6×103个重组子,远大于理论计算的1831个重组子,随机挑选重组子经EcoRI酶切鉴定重组率为100%,文库构建成功;将该菌裂解液与佐剂混合,免疫雄性新西兰大白兔,免疫程序结束后,抽血并分离血清,对用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导后的文库进行免疫印迹筛选,最终得到8个阳性克隆子。本实验为该菌的DNA疫苗以及重要基因表达研究打下基础。
【关键词】普通变形杆菌(Proteus vulgaris) 基因组文库 免疫印迹
【基金】通威科技发展项目; 四川省科技攻关项目(05NG002-002-4)
【所属期刊栏目】淡水渔业
文献传递
