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猪瘟病毒E2基因在百脉根叶绿体基因组中定点整合载体的构建

2007-11-10分类号:S852.65;Q943.2

【作者】杨宗岐  李轶女  张志芳  王勇  沈桂芳  
【部门】南开大学生命科学学院  中国农业科学院生物技术研究所  中国农业科学院生物技术研究所  南开大学生命科学学院  中国农业科学院生物技术研究所 天津300071中国农业科学院生物技术研究所  北京100081  北京100081  北京100081  天津300071  北京100081
【摘要】【目的】构建猪瘟病毒主要抗原E2基因在百脉根叶绿体基因组中定点转化载体,为百脉根叶绿体的转化及用叶绿体生产动物可直接食用疫苗奠定基础。【方法】通过用BLAST、DNAMAN等分子生物学分析软件对百脉根叶绿体基因组序列进行分析选定同源重组片段,采用PCR、分子克隆技术进行载体构建和鉴定。【结果】在百脉根叶绿体基因组中选择合适的外源基因整合位点,设计引物用PCR扩增叶绿体同源片段,将同源片段克隆后,构建百脉根特异的叶绿体转化载体;构建的百脉根叶绿体定点转化载体pAKE2以扩增的1.35kbpsbA和1.5kbtrnK两段相邻叶绿体DNA为定点整合外源基因的同源重组片段,包含以叶绿体基因特异强启动子...
【关键词】猪瘟病毒E2基因  叶绿体转化  同源重组  定点整合  百脉根
【基金】国家自然科学基金资助项目(30571189); 天津市科委基金资助项目(033605111)
【所属期刊栏目】中国农业科学
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