鸡毒霉形体黏附素截短蛋白表达条件的优化
2007-08-15分类号:S852.62
【部门】华中农业大学农业动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室 华中农业大学农业动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室 华中农业大学农业动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室 华中农业大学农业动物遗传育种与繁殖教育部重点实验室 武汉430070 武汉430070 武汉430070 武汉430070
【摘要】研究了培养温度、培养时间、培养基pH值以及异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(isopropylthio-β-D-galacto-side,IPTG)浓度等不同条件对鸡毒霉形体黏附素截短蛋白在大肠杆菌中表达量的影响。经SDS-PAGE分析表明:诱导温度为28℃、诱导时间为9 h、培养基pH值为7.0、IPTG浓度为0.010 mmol/L时目的蛋白在细菌裂解沉淀和上清液中均最大量表达,分别达到30%和17%左右。上清液经GST.Bind Resin亲和层析分离纯化后,洗脱产物中pMGAⅣ融合蛋白纯度高达95%。Western-blot分析表明,该蛋白可被鸡毒霉形体阳性血清识别,具有较好的免疫学活性。
【关键词】鸡毒霉形体 鸡毒霉形体黏附素截短蛋白 原核表达 最佳条件
【基金】湖北省自然科学基金项目(99J0104)资助
【所属期刊栏目】华中农业大学学报
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