超声波直接转导外源基因转化八棱海棠的技术研究
2007-08-15分类号:S661.1
【部门】南京农业大学园艺学院 南京农业大学园艺学院 南京农业大学园艺学院 上海市农业遗传重点实验室/上海市农业科学院生物技术研究中心 南京农业大学园艺学院 江苏南京210095 江苏南京210095 江苏南京210095 上海201106 江苏南京210095
【摘要】应用超声波直接转导法,对八棱海棠进行rolC基因转化,同时,利用gus基因瞬间表达的方法研究了超声波处理时间、处理功率和转化缓冲液中二甲基亚砜(DMSO)对rolC基因转化率的影响。结果表明:当DMSO为5%(体积分数)时,用80 W功率处理20 min,能够获得最佳的转化效果。在超声波最佳处理条件下转化486个八棱海棠叶片,共得到237个抗性愈伤组织和9株抗性苗,转化率为1.85%。GUS染色、PCR及Southern blotting检测结果显示,有8个八棱海棠株系的基因组中整合了完整的外源rolC基因。
【关键词】八棱海棠 超声波转化 rolC基因
【基金】国家自然科学基金资助项目(30370987); 江苏省科技研究资助项目(BJ2003309)
【所属期刊栏目】南京农业大学学报
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