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三黄鸡CD8α/βcDNA克隆与表达及其多克隆抗体的制备

2007-10-15分类号:S852.4

【作者】唐秀山  王磊  廖定为  蒋一男  夏春  
【部门】中国农业大学动物医学院  中国农业大学动物医学院  中国农业大学动物医学院  中国农业大学动物医学院  中国农业大学动物医学院 北京100094  北京100094  北京100094  北京100094  北京100094
【摘要】为了获得鸡CD8α/β蛋白及其多克隆抗体,进一步研究其结构与功能,本实验从三黄鸡cDNA文库中克隆了其CD8α/β胞外区片段,构建了pQE30/ChCD8α/β原核表达系统,并经诱导表达、亲和层析纯化,获得了纯化的重组蛋白(rChCD8α/β),然后用rChCD8α/β分别免疫Balb/c小鼠制备了其多克隆抗体。结果表明:本实验克隆的ChCD8α长483 bp、编码161个氨基酸、可在E.coliJM109中高效表达,蛋白质分子质量为24.0 ku,表达量占菌体蛋白量的25.0%,由该蛋白质所制备的多克隆抗体抗rChCD8α的ELISA效价为1∶1 024 000;另外,克隆的ChCD8β长4...
【关键词】鸡  CD8α  CD8β  原核表达  多克隆抗体
【基金】国家自然科学基金资助项目(30671566)
【所属期刊栏目】中国农业大学学报
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