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实时荧光定量PCR构建奶牛生殖系统PrP基因标准品质粒和标准曲线

2007-04-30分类号:S823

【作者】张太翔  宁章勇  赵德明  周向梅  杨建民  尹晓敏  
【部门】中国农业大学动物医学院/国家动物海绵状脑病实验室  华南农业大学动物医学院  中国农业大学动物医学院/国家动物海绵状脑病实验室  中国农业大学动物医学院/国家动物海绵状脑病实验室  中国农业大学动物医学院/国家动物海绵状脑病实验室  中国农业大学动物医学院/国家动物海绵状脑病实验室 北京100094  广州510642  北京100094  北京100094  北京100094  北京100094
【摘要】为阐释PrP基因在奶牛生殖系统的正常表达和正常的生理功能,以及为确定生殖系统在疯牛病垂直传播中的地位和其分子机理奠定基础,采用实时荧光定量RT-PCR的方法构建了奶牛生殖系统PrP基因的标准质粒和标准曲线。对含有目的基因质粒的EcoRⅠ酶切鉴定表明所插入的片段大小为302 bp,与预期的结果一致。所构建的标准曲线的相关系数r2=0.999,系统生成的回归方程为y=-0.29x+9.48,说明成功构建了奶牛生殖系统PrP基因的标准质粒和标准曲线,为研究PrP基因在奶牛其他组织的定量奠定基础。
【关键词】PrP  RT-PCR  实时荧光定量PCR  标准曲线  奶牛生殖系统  BSE
【基金】国家自然科学基金资助项目(3057139930500371); 教育部博士点基金资助项目(20050019031)
【所属期刊栏目】中国农业大学学报
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