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不同因素对农杆菌介导的杉木转化效率的影响

2007-03-30分类号:S791.27

【作者】席梦利  施季森  
【部门】南京林业大学国家林业局林木遗传和基因工程重点实验室  南京林业大学国家林业局林木遗传和基因工程重点实验室 南京210037  南京210037
【摘要】以杉木试管苗靠近茎尖的茎段为受体材料,研究6个影响杉木遗传转化效果的因素,初步确定杉木茎段较为合适的转化体系为预培养1~3d,OD600nm为0.1~0.4的菌液浸染10~15min,共培养3~5d,共培养基附加乙酰丁香酮(AS)80μmol·L-1,共培养后延迟3d筛选。在初次筛选培养基上共得到186个卡那霉素(Km)抗性芽,在二次筛选培养基上获得39个Km抗性芽。PCR检测有2个Km抗性芽呈稳定阳性,初步证明外源天麻抗真菌蛋白(GAFP)基因已整合到这2个Km抗性芽的基因组DNA中。
【关键词】杉木  农杆菌介导  天麻抗真菌蛋白基因
【基金】国家自然科学基金项目(30170745); 江苏省高校省级重点实验室开放课题(KJS03035)资助。
【所属期刊栏目】林业科学
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