梨属植物RAPD反应体系的建立与优化
2007-03-25分类号:S661.2
【部门】河北农业大学园艺学院 唐山市农业科学研究院 河北农业大学园艺学院 河北保定071001 唐山师范学院生物科学技术系 河北唐山063000 河北唐山063000 河北保定071001
【摘要】以鸭梨、杜梨为材料,对梨属植物DNA的提取及RAPD反应体系进行了系统优化,建立了梨属植物最佳反应体系及参数。结果表明,适当提高抗氧化、抗酚类物质的浓度(2%β-巯基乙醇,2%PVP-40,20 mmol/LNa2S2O5),提取的基因组DNA纯度较高;反应体系中含有Mg2+2.0 mmol/L,dNTPs浓度200μmol/L,引物0.4μmol/L,模板DNA 1.6 ng/μL,Taq DNA聚合酶0.06 U/μL,可成功用于梨属植物RAPD扩增。说明改良的CTAB法能成功用于梨属植物DNA提取,建立的最佳反应体系可用于梨属植物RAPD扩增。
【关键词】梨属植物 RAPD 反应体系
【基金】河北省自然科学基金项目(303240)
【所属期刊栏目】西北农林科技大学学报(自然科学版)
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