心肌特异性α-actin启动子重组腺病毒的构建及其鉴定
2007-08-25分类号:Q78
【部门】西北农林科技大学陕西省干细胞工程技术中心 西北农林科技大学陕西省干细胞工程技术中心 西北农林科技大学陕西省干细胞工程技术中心 西北农林科技大学陕西省干细胞工程技术中心 陕西杨陵712100 陕西杨陵712100 陕西杨陵712100 陕西杨陵712100
【摘要】为了探讨心肌肌动蛋白(α-actin)基因启动子的心肌组织特异性及其表达活性,构建了心肌组织靶向性表达的基因载体,应用PCR从pEGFP-N1-α-actin-P质粒中克隆出α-actin启动子片段,将其插入到切除CMV启动子的腺病毒穿梭载体pAdTrack中,构建出pAdTrack-actin重组穿梭载体,经酶切和测序鉴定正确后用PmeI线性化,与含有腺病毒骨架DNA的pAdEasy-1质粒在BJ5183大肠杆菌细胞中同源重组成新的重组体pAd-easy-actin,抽提重组体DNA,经PacI酶切回收后以脂质体法转染人胚肾细胞株HEK293,包装出完整腺病毒pAd-actin进行PCR检测...
【关键词】腺病毒载体 α-肌动蛋白启动子 胚胎干细胞
【基金】国家“863”计划项目(2002AA216161); 国家自然科学基金项目(30200137)
【所属期刊栏目】西北农林科技大学学报(自然科学版)
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