葡萄芪合酶基因cDNA片段酵母表达载体的构建及其在酿酒酵母中的表达
2007-12-25分类号:Q78
【部门】西北农林科技大学生命科学学院 西北农林科技大学园艺学院 陕西杨凌712100
【摘要】应用基因重组技术,将从华东葡萄白河-35-1中分离出的长1179 bp芪合酶(stilbene synthase,STS)基因的cDNA片段克隆入大肠杆菌-酵母菌穿梭型诱导表达载体pYES6/CT上,构建重组酵母真核表达质粒pYES6/CT-STS,转化酿酒酵母菌株INVSc1,用Blasticidin(bsd)筛选出阳性克隆转化子,经半乳糖诱导表达后进行5个时间段菌体全蛋白SDS-PAGE电泳和Western-blot分析。结果发现,诱导4 h后开始有目标带(48 ku)出现,诱导16 h开始大量且稳定表达。证明目的基因片段可以在酿酒酵母中表达,为后续基因功能的验证奠定了基础。
【关键词】芪合酶 酵母表达载体 载体构建 诱导表达
【基金】国家科技部转基因专项(JY03-A-19-02); 西北农林科技大学科研专项(JY-A-19-02)
【所属期刊栏目】西北农林科技大学学报(自然科学版)
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