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大豆SSR技术反应体系的优化

2007-10-28分类号:S565.1

【作者】刘海云  王敏  王继亮  程芳艳  杜维俊  
【部门】山西农业大学农学院  山西农业大学农学院  山西农业大学农学院  山西农业大学农学院  山西农业大学农学院 山西太谷030801  山西太谷030801  山西太谷030801  山西太谷030801  山西太谷030801
【摘要】以大豆为材料,研究了PCR反应体系的主要成分模板DNA浓度、dNTP浓度、引物浓度、Taq酶浓度及退火温度对大豆SSR扩增结果的影响,探索影响SSR扩增结果的各因素的最佳用量及引物的退火温度。结果表明:在试验设计范围内,DNA浓度和dNTP浓度对扩增影响较大,引物浓度在0.05~0.2μmol/L范围内对扩增影响较小,Taq酶浓度对扩增有一定影响,引物要有其扩增适宜的退火温度。确立了适合大豆SSR分子标记研究的优化体系。最终确定总反应体系为20μL,模板DNA 20 ng,dNTP 200μmol/L,引物0.15μmol/L,Taq酶0.5 U,10×Taq Buffer 1.5 mmol/...
【关键词】大豆  SSR  反应体系
【基金】国家自然科学基金项目(30471094); 山西省科技攻关项目(051017); 山西省高校青年学术带头人项目(200425)
【所属期刊栏目】华北农学报
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