RT-PCR快速检测3种烟草病毒技术
2007-08-28分类号:S435.72
【部门】北京农学院植物科学技术系 北京农学院植物科学技术系 军事医学科学院放射医学研究所 军事医学科学院放射医学研究所 北京农学院植物科学技术系 北京农学院植物科学技术系 北京102206 北京102206 北京100850 北京100850 北京102206 北京102206
【摘要】为了快速提取植物叶片的总RNA,并对烟草病毒进行检测,对提取及检测方法进行了研究。结果表明:以黄瓜叶片、白肋烟叶片为试材,用TRIzol试剂盒在1 h内提取到纯度高、完整性好的总RNA。设计烟草花叶病毒、黄瓜花叶病毒和马铃薯X病毒的特异性引物,RT-PCR检测,从感病叶片中分别扩增出313,326,392 bp的目的片断,而健康叶片中无此扩增带。构建这3种病毒重组质粒,对核苷酸序列与GeneBank中报道的进行比较,同源性分别为99.36%,97.55%,98.21%。用这种方法快速、可靠,为烟草病毒的检测提供科学依据。
【关键词】烟草花叶病毒 黄瓜花叶病毒 马铃薯X病毒 RT-PCR
【基金】北京市教育委员会项目(KM200610020007); 北京市自然基金(5043026)
【所属期刊栏目】华北农学报
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