用反向遗传8质粒系统构建流感H1N1重组病毒
2007-09-25分类号：Q78
【部门】西北农林科技大学动物科技学院 军事医学科学院微生物流行病研究所 军事医学科学院微生物流行病研究所 西北农林科技大学动物科技学院 军事医学科学院微生物流行病研究所 西北农林科技大学动物科技学院 陕西杨陵712100 军事医学科学院微生物流行病研究所 北京100071 北京100071 北京100071 陕西杨陵712100 北京100071 陕西杨陵712100
【摘要】为了建立用于流感病毒拯救的反向遗传操作系统,用RT-PCR方法扩增得到A型流感病毒流行株A/shanghai/7/99的HA和NA基因,将其克隆到pGEM-T载体上并测序,挑选阳性克隆分别用BsmBⅠ、BsaⅠ酶切,连接到以BsmBⅠ酶切的双向转录/表达载体pAD3000上,获得重组质粒pAD-HA和pAD-NA,分别与含A/PR/8/34流感病毒7个基因的阳性质粒共转染COS-1细胞,拯救了重组病毒R-HA-PR8和R-NA-PR8,说明构建的重组质粒pAD-HA和pAD-NA是正确的,将pAD-HA和pAD-NA与含A/PR/8/34流感病毒6个基因的阳性质粒共转染COS-1细胞,培养48...
【关键词】流感病毒 反向遗传学 8质粒系统 重组病毒
【基金】
【所属期刊栏目】西北农林科技大学学报(自然科学版)
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