山羊β-酪蛋白基因调控区的克隆及启动子活性的检测
2007-06-25分类号:Q78
【部门】西北农林科技大学生物工程研究所 西北农林科技大学生物工程研究所 西北农林科技大学生物工程研究所 陕西杨凌712100 陕西杨凌712100 陕西杨凌712100
【摘要】为了克隆山羊β-酪蛋白基因的调控区并检测5′调控区的启动子活性,利用Long PCR技术对西农莎能奶山羊β-酪蛋白基因(CSN2)5′和3′调控区进行了克隆(5′调控区分两段进行克隆,3′调控区进行直接克隆)、测序,将克隆的5′调控区的两个片段通过共有的单一性酶切位点HindⅢ融合成一个长为6.7 kb的片段,用其替代表达载体pEGFP-C1上原来的启动子CMV,指导报告基因绿色荧光蛋白(GFP)在山羊乳腺上皮细胞中的瞬时表达。结果表明,克隆的GC 3.3、GC 4.3、GC 6.6 3个片段与GenBank中登录的山羊CSN2基因相应序列相比,同源性均为99%,其包含了TATA box、GC...
【关键词】山羊 β-酪蛋白基因(CSN2) 调控区 PCR GFP基因
【基金】国家“863”高技术项目(2004AA213072)
【所属期刊栏目】西北农林科技大学学报(自然科学版)
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