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雷帕霉素产生菌吸水链霉菌NRRL5491接合转移系统的建立

2007-10-15分类号:Q78

【作者】杨旻  陶美凤  
【部门】华中农业大学农业微生物学国家重点实验室  华中农业大学农业微生物学国家重点实验室 武汉430070  武汉430070
【摘要】对标准的链霉菌接合转移方法进行优化建立起适用于吸水链霉菌NRRL5491的接合转移系统。40℃温浴20 min为孢子的最佳热激处理条件;整合型质粒pSET152的接合转移效率是穿梭型质粒pOJ446的3~6倍;当阿泊拉霉素覆盖浓度为1μg/mL时,pSET152的接合转移效率是50μg/mL时的4.6倍,而pOJ446接合转移效率相应提高了2.4倍;MS培养基上接合转移效率是SY琼脂培养基上的3.4倍。采用最适优化条件时,接合转移频率可达到2×10-6,足够用于基因置换等遗传操作。
【关键词】吸水链霉菌NRRL5491  雷帕霉素  接合转移
【基金】国家自然科学基金项目(30570030)资助
【所属期刊栏目】华中农业大学学报
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