谷胱甘肽硫转移酶与hEGF在大肠杆菌中的融合表达及活性研究
2007-08-25分类号:Q78
【部门】西北农林科技大学生命科学学院 西北农林科技大学生命科学学院 西北农林科技大学生命科学学院 陕西杨凌712100 西北农林科技大学植物保护学院 陕西杨凌712100 陕西杨凌712100 陕西杨凌712100
【摘要】为了得到具有生物学活性的人表皮生长因子(hEGF),将含有人表皮生长因子基因的原核表达载体pGEX-4t-1(+)-hEGF转化入BL21-CodonPlusTM-RP表达宿主菌进行大量表达,SDS-PAGE分析表明,融合蛋白主要以包涵体的形式存在。收集包涵体,用氧化复性的方法,加入还原型的谷胱甘肽进行复性,之后通过GlutathioneSepharoseTM4B纯化柱,分离纯化得到复性的融合蛋白。以兔抗人EGF单克隆抗体为一抗,进行Western blotting鉴定,证明分离纯化得到的融合蛋白含有目的蛋白hEGF。最后对复性的融合蛋白进行了活性分析,表明该融合蛋白具有良好的hEGF生物学活...
【关键词】表皮生长因子 pGEX-4T-1 BL21-CodonPlusTM-RP 分离纯化 生物学活性
【基金】国家“863”高技术研究与发展计划项目(2001AA213081); 西北农林科技大学重点专题基金项目
【所属期刊栏目】西北农林科技大学学报(自然科学版)
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