表达Cre重组酶的真核细胞系的建立及在重组伪狂犬病病毒研究中的应用
2007-11-15分类号：Q78
【部门】南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室 南京医科大学微生物与免疫学教研室 南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室 南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室 南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室 南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室 江苏南京210095 江苏南京210029 江苏南京210095 江苏南京210095 江苏南京210095 江苏南京210095
【摘要】根据Cre基因序列设计并合成1对引物,PCR扩增出Cre基因编码区,克隆于pIREShyg载体,得到重组质粒pIREShyg-Cre,转染HEK-293A细胞后经400μg.mL-1 Hygromycin B的筛选,将其中1个阳性克隆命名为293A-Cre。利用伪狂犬病病毒(Pseudorabies virus,PRV)S03109株(带有gfp报告基因表达盒及loxP位点)感染293A-Cre细胞,荧光显微镜观察、PCR及Western blot检测gfp基因的表达。结果表明,S03109感染293A-Cre二代后loxP位点间的gfp表达盒被删除,获得重组病毒S0419。将S0419感染已...
【关键词】伪狂犬病病毒 PCR Cre重组酶 真核细胞系 loxP
【基金】
【所属期刊栏目】南京农业大学学报
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