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磁珠富集法制备大口鲶的微卫星分子标记

2006-04-30分类号:S917.4

【作者】全迎春  孙效文  刘伟  梁利群  鲁翠云  
【部门】中国水产科学研究院黑龙江水产研究所  中国水产科学研究院黑龙江水产研究所  中国水产科学研究院黑龙江水产研究所  中国水产科学研究院黑龙江水产研究所  中国水产科学研究院黑龙江水产研究所 黑龙江哈尔滨150070  上海水产大学生命科学与技术学院  上海200090  黑龙江哈尔滨150070  黑龙江哈尔滨150070  黑龙江哈尔滨150070  黑龙江哈尔滨150070
【摘要】通过磁珠富集的方法分离大口鲶(Silurus meriaionalis)的微卫星分子标记。将基因组DNA酶切,梯度离心收集400~900bp片段并纯化,连接Brown接头,用生物素标记的寡核苷酸(CA)15作探针与其杂交,杂交复合物结合到包被有链霉亲和素的磁珠上,然后将这些片段洗脱,PCR扩增,进行克隆构建“基因组文库”,再通过同位素标记的探针(CA)15进行2次杂交筛选,所得到的阳性克隆测序。从所获得593个阳性克隆中选取178个经测序,97.19%(173个)含有微卫星序列,90.60%重复数在10以上,75.98%为完美型。除探针中使用的CA重复单元外,还观察到CT、GA、ATG的重复序...
【关键词】大口鲶  微卫星  磁珠富集
【基金】鱼类微卫星等遗传标记的筛选;分子标记辅助育种的应用基础研究(2004CB117405)
【所属期刊栏目】水产学报
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