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水牛朊蛋白成熟片段基因的克隆与原核表达

2006-12-10分类号:S852.65

【作者】袁志栋  王志亮  刘雨田  吴晓东  赵永刚  刘海生  
【部门】湖南科技大学生命科学学院  农业部动物检疫所国家外来动物疫病诊断中心/国家BSE参考实验室  农业部动物检疫所国家外来动物疫病诊断中心/国家BSE参考实验室  农业部动物检疫所国家外来动物疫病诊断中心/国家BSE参考实验室  农业部动物检疫所国家外来动物疫病诊断中心/国家BSE参考实验室  江西农业大学 湘潭411201农业部动物检疫所国家外来动物疫病诊断中心/国家BSE参考实验室  青岛266032  青岛266032  青岛266032  青岛266032  青岛266032  南昌330045
【摘要】目的克隆、分析水牛朊蛋白(prionprotein,PrP)成熟片段基因,并获取纯化的表达产物。方法将应用PCR技术扩增的水牛成熟PrP的核酸序列克隆到表达载体pET-32a,并分析其序列;把阳性克隆质粒pET-32a-BPrP转化表达菌BL21(DE3),鉴定纯化的表达产物。结果水牛朊蛋白成熟片段核酸序列及其推导的氨基酸序列与已知其他牛科动物的成熟PrP核酸、氨基酸序列间的相似性分别在97.1%和97.2%以上,并且发现水牛成熟PrP有5个重复序列,编码的氨基酸序列其中有2个九肽和3个八肽重复序列。具有较高的表达水平的PrP融合蛋白被纯化后,用Western印迹实验证明该蛋白具有PrP抗原活...
【关键词】水牛成熟PrP  克隆  序列分析  原核表达
【基金】国家自然科学基金(30270981); 青岛市自然科学基金; 农业部948项目(982070); 农业部疯牛病监测项目资助
【所属期刊栏目】中国农业科学
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