牛分枝杆菌MPB83基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达
2006-12-30分类号：S852.61
【部门】中国农业大学动物医学院/国家动物海绵状脑病实验室 中国农业大学动物医学院/国家动物海绵状脑病实验室 中国农业大学动物医学院/国家动物海绵状脑病实验室 中国农业大学动物医学院/国家动物海绵状脑病实验室 中国农业大学动物医学院/国家动物海绵状脑病实验室 北京100094 北京100094 北京100094 北京100094 北京100094
【摘要】为观察重组MPB83蛋白的免疫活性,揭示该蛋白在牛结核病的诊断和防治中的作用,克隆了牛分枝杆菌MPB83基因,构建了克隆载体pGEM-MPB83和表达载体pET30a-MPB83,经IPTG诱导在大肠杆菌BL21(DE3)中表达,用SDS-PAGE和免疫印迹分析表达产物并进行蛋白纯化。试验结果表明:牛分枝杆菌MPB83基因体外扩增产物与预期值相符,约600 bp;所构建表达质粒pET30a-MPB83经测序,结果与预期一致;SDS-PAGE分析表明,该融合蛋白以包涵体的形式表达,其分子质量约为26 ku,蛋白表达量占菌体总蛋白的20%;该蛋白经电洗脱纯化后,纯度达95%以上;免疫印迹分析表明,...
【关键词】牛分枝杆菌 MPB83基因 克隆 原核表达 免疫印迹 蛋白纯化
【基金】国家重点基础研究发展计划专项(2005CB523000); 国家自然科学基金资助项目(30500371); 博士点基金资助项目(20050019031)
【所属期刊栏目】中国农业大学学报
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