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用实时荧光定量RT-PCR方法定量绵羊PrP基因的表达

2006-04-30分类号:S826

【作者】韩彩霞  赵德明  吴长德  宁章勇  杨建民  刘美丽  马李颖  
【部门】国家动物海绵状脑病实验室中国农业大学  国家动物海绵状脑病实验室中国农业大学  国家动物海绵状脑病实验室中国农业大学  国家动物海绵状脑病实验室中国农业大学  国家动物海绵状脑病实验室中国农业大学  国家动物海绵状脑病实验室中国农业大学  国家动物海绵状脑病实验室中国农业大学 北京100094  北京100094  北京100094  北京100094  北京100094  北京100094  北京100094
【摘要】为快速、准确定量绵羊PrP基因的mRNA,建立了绵羊PrP基因实时荧光定量聚合酶链反应检测方法。根据已报道的绵羊PrP基因序列,设计合成引物;采用RT-PCR方法扩增目的片段;构建标准重组质粒制备标准曲线,用于样品检测。结果发现,中枢神经系统组织PrP基因的表达量(copies/ng总RNA,39420)比外周组织(为7845)的高;在中枢神经系统中,脑干的PrP基因的表达量最高(为67020);外周器官中,淋巴结PrP基因的表达量最高(为29086),肾脏的表达量最低(为125)。建立绵羊PrP基因实时荧光定量PCR方法,对PCR扩增反应中每一个循环的产物进行定量分析,为进一步研究绵羊组织器...
【关键词】朊蛋白  RT-PCR  基因表达  实时荧光定量PCR
【基金】国家自然科学基金资助项目(3037106230400325); 教育部博士点基金资助项目(20020019006)
【所属期刊栏目】中国农业大学学报
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