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栉孔扇贝急性病毒性坏死症病毒cDNA文库的构建及部分序列分析

2006-05-30分类号:S944.43

【作者】王崇明  艾海新  刘英杰  王秀华  李赟  
【部门】中国水产科学研究院黄海水产研究所  中国水产科学研究院黄海水产研究所  中国水产科学研究院  中国水产科学研究院黄海水产研究所  中国海洋大学海水养殖教育部重点实验室 山东青岛266071  山东青岛266071  中国海洋大学海水养殖教育部重点实验室  山东青岛266003  北京100039  山东青岛266071  山东青岛266003
【摘要】急性病毒性坏死症病毒(Acute Virus Necrobiotic Virus,AVNV)已被证实是一种对养殖栉孔扇贝(Chlamys farreri)危害极大的致病病原。本研究应用基因克隆技术对AVNV基因组进行cDNA合成、克隆,并对部分克隆进行序列分析。采用差速和蔗糖密度梯度离心法,分离纯化AVNV。用Trizol试剂抽提病毒RNA,采用随机引物和Oligo(dT)双引物法,SuperScriptⅡ反转录酶合成cDNA,并克隆于pUC118质粒上,利用蓝白斑筛选阳性克隆子,PCR法快速鉴定重组质粒。经筛选得到2个阳性克隆23#、52#,插入片段大小约为1 200 bp和800 bp。测...
【关键词】栉孔扇贝  急性病毒性坏死病毒  cDNA文库  克隆  序列分析
【基金】国家重点基础研究规划项目资助(G1999012001); 山东省科技攻关项目资助(2004GG2205115)
【所属期刊栏目】中国水产科学
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