团头鲂微卫星标记的快速制备
2006-03-30分类号:S917.4
【部门】中国水产科学研究院黑龙江水产研究所 中国水产科学研究院黑龙江水产研究所 中国水产科学研究院黑龙江水产研究所 中国水产科学研究院黑龙江水产研究所 黑龙江哈尔滨150070 上海水产大学生命科学与技术学院 上海200090 黑龙江哈尔滨150070 黑龙江哈尔滨150070 黑龙江哈尔滨150070
【摘要】采用磁珠富集法与放射性杂交相结合开发团头鲂(Megalobrama amblycephala)基因组微卫星资源。以团头鲂基因组DNA为材料,经Sau3AⅠ限制性内切酶消化后,选取400~900 bp的片段进行PCR全基因组扩增,并利用生物素标记的(CA)15探针进行微卫星片段的富集。将得到的片段与T载体连接后转入DH5α大肠杆菌中,然后利用γ-32P标记的放射性同位素探针进行第二轮杂交。结果表明,共获得微卫星基因组文库2 000个菌,杂交前菌落PCR检测阳性克隆率为50%;杂交后得到的阳性克隆为230个,占11.5%。从得到的230个阳性克隆中挑出120个进行测序,有94个克隆含有重复次数大于...
【关键词】团头鲂 微卫星 磁珠富集
【基金】国家“973”重点基础研究发展计划项目(2004CB117405)
【所属期刊栏目】中国水产科学
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