牛结核分支杆菌MB1916c基因的克隆和原核表达
2006-12-30分类号：S852.61
【部门】中国农业大学动物医学院/国家动物海绵状脑病实验室 中国农业大学动物医学院/国家动物海绵状脑病实验室 北京100094 北京100094
【摘要】构建牛结核分支杆菌MB1916 c的原核表达载体,获得了高纯度的融和表达蛋白。以牛结核分支杆菌DNA为模板,利用PCR方法扩增出牛结核分支杆菌MB1916 c基因片段,将回收纯化后的产物克隆到pGEM-T载体,测序分析鉴定为阳性的质粒,经SacⅠ/KpnⅠ双酶切后与同样条件下双酶切后的pET-30a(+)载体连接,再转化到E.coliBL21(DE3)表达菌株中,经菌落PCR快速筛选克隆,以SacⅠ/KpnⅠ双酶切和测序分析鉴定。确定正确的阳性菌株IPTG诱导后,收集菌体进行SDS-PAGE和Western-blotting分析。结果显示:以牛结核分支杆菌DNA为模板,PCR后得到了MB191...
【关键词】牛结核分支杆菌 促复苏因子C MB1916c基因 原核表达
【基金】博士后基金资助项目; 国家重点基础研究发展计划项目(2005CB23000)
【所属期刊栏目】中国农业大学学报
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