应用噬菌体随机十二肽库筛选猪传染性胸膜肺炎菌体抗原模拟表位
2006-08-30分类号:S852.4
【部门】华中农业大学水产学院 华中农业大学动物医学院 华中农业大学水产学院 华中农业大学水产学院 华中农业大学水产学院 华中农业大学动物医学院 武汉成长动物营养研究所 武汉430070 武汉430070 武汉430070 武汉430070 武汉430070 武汉430070 武汉430070
【摘要】利用猪传染性胸膜肺炎灭活菌苗免疫日本大耳兔得到猪传染性胸膜肺炎抗血清,将血清用饱和硫酸铵粗提IgG后,经DEAE-sephadex-A50低压层析系统纯化,以此得到IgG作为配基包被酶标板,对噬菌体随机十二肽库进行3轮不同条件的富集筛选,通过改变筛选条件,噬菌体的回收率从5.76×10-5增加到了1.69×10-2,P/N值逐步提高;随机挑取10个噬菌斑进行扩增,用ELISA检测其免疫活性,结果有6个阳性克隆与纯化的IgG有较强的特异性结合能力;对筛选到的6个阳性克隆提取ssDNA进行测序,并分析其氨基酸序列,其中5个克隆所递呈的序列一致,用Blastp软件进行分析,2种类型的氨基酸序列之间无...
【关键词】噬菌体随机肽库 模拟表位 猪胸膜肺炎放线杆菌
【基金】湖北省自然科学基金项目(2004ABA133)资助
【所属期刊栏目】华中农业大学学报
文献传递