固始鸡白细胞介素2基因的克隆、表达及其表达蛋白活性的检测
2006-05-25分类号：S852.4
【部门】河南农业大学牧医工程学院河南农业生物工程技术重点实验室 河南农业大学牧医工程学院河南农业生物工程技术重点实验室 河南农业大学牧医工程学院河南农业生物工程技术重点实验室 郑州牧业工程高等专科学校 河南农业大学牧医工程学院河南农业生物工程技术重点实验室 河南农业大学牧医工程学院河南农业生物工程技术重点实验室 河南农业大学牧医工程学院河南农业生物工程技术重点实验室 河南农业大学牧医工程学院河南农业生物工程技术重点实验室 河南郑州450002 河南郑州450002 河南郑州450002 河南郑州450011 河南郑州450002 河南郑州450002 河南郑州450002 河南郑州450002
【摘要】参照GenBank上已发表的鸡白细胞介素2序列设计引物,运用RT-PCR技术,从经ConA诱导的 20～35日龄固始鸡脾细胞总RNA中扩增出目的片段,IL-2基因,将其插入到pGEM-T载体上,构建了克隆质粒 pGEM-T-chIL-2。测序结果表明,本试验克隆的固始鸡白细胞介素2基因与GenBank上已发表的序列相比,存在2 个核苷酸变异。重新设计表达引物,以克隆质粒pGEM-T—chIL一2为模板PCR扩增表达片段,对表达片段进行 Hind Ⅲ和BamH Ⅰ双酶切,连接到作同样双酶切的pET28a表达载体上,鉴定后转化大肠杆菌BL21并进行IPTG 诱导表达,然后对表达产物进行SDS-PA...
【关键词】固始鸡 白细胞介素2 原核表达 生物活性
【基金】国家863计划项目(2002AA242021); 河南省科技厅重大攻关项目(0322010600)
【所属期刊栏目】西北农林科技大学学报(自然科学版)
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