荧光定量RT-PCR法检测运输应激猪热休克蛋白mRNA转录水平
2006-01-10分类号：S852.2
【部门】南京农业大学农业部动物生理生化重点开放实验室 南京农业大学农业部动物生理生化重点开放实验室 农业部动物检疫所 南京农业大学农业部动物生理生化重点开放实验室 南京210095农业部动物检疫所 青岛266032 南京210095 青岛266032 南京210095
【摘要】目的探讨应激时热休克蛋白mRNA转录水平的变化。方法根据HSP90、HSP70和GAPDHmRNA序列,设计并合成引物,将PCR扩增的基因片段克隆到pGEM-T载体,重组质粒经筛选、鉴定,体外转录出RNA,梯度稀释作为阳性模板,用于标准曲线的制定和样品检测,建立了一步法实时荧光定量RT-PCR技术平台,并用于检测长途运输猪心脏和肝脏中HSP70及HSP90mRNA转录水平的改变。结果经1、2、4、6和10h的运输应激后,组织中HSP70mRNA的转录水平随着运输应激时间的延长一直呈现出上升的趋势,运输应激到10h时HSP70mRNA的转录水平升到最高,肝脏和心脏组织中HSP70mRNA的转录水...
【关键词】猪 热休克蛋白 SYBRGreenI 荧光定量PCR 运输应激
【基金】国家自然科学基金(39770569,30170682); 中德农业科技合作项目
【所属期刊栏目】中国农业科学
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