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棉花抗黄萎病相关基因筛选与亚克隆文库构建

2006-12-30分类号:S562

【作者】王文生  王省芬  马峙英  张桂寅  
【部门】河北农业大学河北省作物种质资源重点实验室  河北农业大学河北省作物种质资源重点实验室  河北农业大学河北省作物种质资源重点实验室  河北农业大学河北省作物种质资源重点实验室 河北保定071001  河北保定071001  河北保定071001  河北保定071001
【摘要】以黄萎病菌诱导下差异表达的棉花抗病相关基因片段PR8为探针,利用杂交方法,对优质、抗病海岛棉品种Pima90-53 BAC文库进行筛选。从30 336个BAC克隆中筛选到含有PR8基因片段的4个阳性克隆,分别为127K13,128D14,169J3和178C5。用Sau3AI对其中的169J3克隆进行酶切,回收2~4 kb的DNA片段并连接到载体pUC118BamHI-BAP上,构建了含有该基因片段的亚克隆文库,共含有4 224个克隆。经电泳检测,插入片段在1~3 kb,平均为2 kb。该亚克隆文库的构建为克隆PR8基因奠定了基础。
【关键词】棉花  黄萎病  BAC  亚克隆文库  基因克隆
【基金】国家“973”项目(2004CB117302-1); 国家自然科学基金(30270848); 教育部重点科技项目(204017)
【所属期刊栏目】华北农学报
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