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用抑制消减杂交法分离巴西橡胶树胶乳特异表达基因

2006-06-30分类号:S794.1

【作者】邓柳红  罗明武  曾会才  杨卫帆  张春发  
【部门】中国热带农业科学院热带生物技术国家重点实验室  华南热带农业大学  中国热带农业科学院热带生物技术国家重点实验室  中国热带农业科学院热带生物技术国家重点实验室  中国热带农业科学院热带生物技术国家重点实验室 海口571101  儋州571737  海口571101  海口571101  海口571101
【摘要】采用巴西橡胶树常割树胶乳的Poly(A+)RNA为Tester,叶片Poly(A+)RNA为Driver,通过抑制消减杂交法(suppressivesubtractivehybridization,SSH)构建了一个胶乳特异表达基因差减文库,通过菌落PCR及反式NorthernDot-Blot筛选鉴定阳性差异片段,获得79个胶乳特异表达阳性克隆,部分阳性克隆还通过NorthernBlot杂交及RT-PCR进一步验证。随机挑选部分阳性克隆序列比较分析,结果表明有部分克隆与巴西橡胶树中已知的基因相同,而多数克隆在巴西橡胶树中是新发现,它们与橡胶生物合成、物质代谢运输、信号传导和形态建成等相关。
【关键词】巴西橡胶树  抑制消减杂交法  胶乳  反式NorthernDot-Blot
【基金】中国热带农业科学院科技基金项目(Rykj0420)。
【所属期刊栏目】林业科学
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