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甜槠ISSR-PCR反应体系的正交优化

2006-10-30分类号:S792.17

【作者】张文标  金则新  李钧敏  潘冠琼  
【部门】西南师范大学三峡库区生态环境教育部重点实验室  台州学院生态研究所  台州学院生态研究所  台州学院生态研究所 重庆400715  台州学院生态研究所  浙江临海317000  浙江临海317000  浙江临海317000  浙江临海317000
【摘要】对甜槠Castanopsis eyrei进行遗传多样性研究的过程中,为了获得清晰可靠、重复性强的ISSR扩增结果,利用正交设计对Mg2+,dNTP,引物,Taq酶,牛血清蛋白(BSA)和模板DNA等6种因素5个水平进行筛选和优化。确定甜槠ISSR-PCR最适宜反应体系为:10μL反应体积中,1×Taq酶配套缓冲液(10 mmol.L-1Tris-HCl,pH 9.0,50 mmol.L-1KCl,10 g.L-1TritonX-100),1.7 mmol.L-1Mg2+,0.25 mmol.L-1dNTP,8.34 nkatTaqDNA聚合酶,1.5 g.L-1牛血清白蛋白,6 pmol引物,...
【关键词】植物学  ISSR-PCR  正交设计  优化  甜槠
【基金】浙江省自然科学基金资助项目(Y504220)
【所属期刊栏目】浙江林学院学报
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