松材线虫RAPD-PCR反应体系的优化与分子鉴定标记的筛选
2006-05-30分类号:S763.3
【部门】南京农业大学生命科学学院 南京农业大学生命科学学院 南京农业大学生命科学学院 南京农业大学生命科学学院 南京农业大学生命科学学院 农业部病虫监测与治理重点开放实验室 江苏南京210095
【摘要】应用随机引物S344、S356和S360比较分析了PCR热循环复性温度、Mg2+浓度和模板浓度对松材线虫基因组DNA的RAPD扩增结果的影响,旨在建立松材线虫的最佳反应体系,并以此进行松材线虫的分子鉴定标记筛选。结果表明:37℃的复性温度、3.0 mmol.L-1Mg2+、10μL反应体系中松材线虫基因组DNA模板1~25 ng是研究松材线虫RAPD特征的最佳反应体系。利用此反应体系,通过对100个随机引物的分析,获得了3条松材线虫区别于拟松材线虫的分子鉴定标记。
【关键词】松材线虫 RAPD优化反应体系 分子鉴定标记
【基金】江苏省科委科技攻关项目(BE99359); 南京农业大学青年创新基金项目(y2004417)
【所属期刊栏目】南京农业大学学报
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