毛白杨4-CL cDNA的克隆、表达及活性分析
2006-04-30分类号：Q943.2
【部门】中国农业科学院油料作物研究所 中国农业科学院油料作物研究所 中国科学院遗传与发育生物学研究所 中国农业科学院油料作物研究所 中国农业科学院油料作物研究所 武汉430062 武汉430062 北京100101 武汉430062 武汉430062
【摘要】从毛白杨(Populus tomentosa)木质化茎中提取总RNA,利用RT-PCR技术进行cDNA扩增,获得1条1 621 bp的片段。测序结果表明:该片段编码536个氨基酸组成的多肽,序列中包含所有已知4-CL蛋白的2个特征序列boxⅠ(SSGTTGLPKGV)和boxⅡ(GEICIRG)。将cDNA克隆到原核表达载体pET-32a(+)中,并转化大肠杆菌(Escherichia coli)感受态细胞BL21(DE3)。IPTG诱导后,经SDS-PAGE和Western-blot分析表明,4-CL基因在大肠杆菌BL21中获得表达,所表达融合蛋白的分子量约为70 ku。酶活性分析表明:该重...
【关键词】毛白杨 4-香豆酰辅酶A连接酶 原核表达 偏爱性
【基金】国家自然科学基金(30571177); 国家“863”计划项目(2001AA241101,2004AA241100)资助
【所属期刊栏目】华中农业大学学报
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