绿色巴夫藻cDNA文库的构建及EST序列分析
2006-11-30分类号:Q943.2
【部门】山东大学微生物技术国家重点实验室 山东大学微生物技术国家重点实验室 山东大学微生物技术国家重点实验室 山东大学微生物技术国家重点实验室 山东济南250100 山东济南250100 山东济南250100 山东济南250100
【摘要】将绿色巴夫藻(Pavlova viridis)培养液逐种加入氨苄青霉素、硫酸庆大霉素、硫酸阿米卡星3种抗生素处理,经检验后无杂菌污染。以该藻种为实验材料,以λTriplEx2为载体,利用SMART技术构建其cDNA文库。经测定文库滴度为6×106pfu/mL,重组率为98%。利用PCR方法检测cDNA文库插入DNA片段的大小,其长度为0.5~2 kb,表明该文库达到建库要求,可用来筛选低丰度mRNA的基因克隆。对cDNA文库中的阳性克隆进行随机PCR扩增,挑选插入DNA片段较大的克隆,进行5’末端单向序列测定,测序结果与NCBI数据库进行BLAST比对,获得了200个有研究价值的EST序列和c...
【关键词】绿色巴夫藻 cDNA文库 SMART技术 序列表达标签 多不饱和脂肪酸
【基金】国家自然科学基金资助项目(30370035)
【所属期刊栏目】中国水产科学
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