耐热菌的竞争定量PCR检测方法优化与建立
2006-02-10分类号：Q93-33
【部门】陕西师范大学食品工程系 兰州理工大学生命科学与工程学院 陕西师范大学食品工程系 西安710062 兰州730050 西安710062
【摘要】【目的】研究苹果浓缩汁中耐热菌(Alicyclobacillusacidoterrestris)的定量PCR快速检测法。【方法】通过引物设计、PCR扩增及凝胶纯化试剂盒回收,构建并获得耐热菌的PCR竞争模板;用获得的竞争模板作为定量内标物建立耐热菌的竞争定量PCR(QC-PCR)检测体系。【结果】经对建立的QC-PCR检测体系优化,目标模板检测灵敏度由5×104个分子/PCR体系,提高到50个分子/PCR体系,竞争模板和目标模板分子共扩增可检测到5×102个目标模板分子/PCR体系,并能从人工回添苹果浓缩汁样品中定量检测到5×103cfu/PCR体系的耐热菌,整个检测时间为4～5h,比传统的细...
【关键词】耐热菌 苹果浓缩汁 竞争定量PCR
【基金】国家科技攻关项目(2001BA804A28); 科技部“十五”星火计划项目(2001EA85030)
【所属期刊栏目】中国农业科学
文献传递
