重组酶Cre基因在大肠杆菌中的高效表达及其一步纯化和活性检测
2006-05-30分类号：Q78
【部门】北京林业大学生物科学与技术学院 北京林业大学生物科学与技术学院 北京林业大学生物科学与技术学院 北京林业大学生物科学与技术学院
【摘要】为了实现DNA重组酶Cre在体外的应用,以pET-30a高效表达载体为基础构建了pTE30-Cre质粒.将此质粒导入大肠杆菌BL21(DE3)中进行IPTG诱导的Cre基因的高效表达.对表达出的Cre重组酶蛋白进行镍离子鳌合法一步纯化,并以带有两个同向loxP位点的质粒为底物,对纯化出的Cre酶进行活性检测.该实验为Cre酶的体外应用奠定了基础.
【关键词】DNA重组酶Cre pET30-Cre高效表达 一步纯化 Cre酶活性检测
【基金】国家自然科学基金项目(30271066;30571512); “973”国家重大基础规划项目(TG1999016005)
【所属期刊栏目】北京林业大学学报
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