大肠杆菌6-磷酸甘露糖异构酶基因的克隆与表达
2006-10-30分类号:Q78
【部门】华中农业大学生命科学技术学院 华中农业大学植物科学技术学院 华中农业大学植物科学技术学院 华中农业大学植物科学技术学院 华中农业大学生命科学技术学院 武汉430070 武汉430070 武汉430070 武汉430070 武汉430070
【摘要】通过PCR克隆了大肠杆菌6-磷酸甘露糖异构酶基因manA,分别构建了含manA基因的原核和真核生物表达载体。在大肠杆菌中经IPTG诱导表达的GST-PMI融合蛋白,经亲和层析纯化和PreScission蛋白酶酶切,SDS-PAGE分析证实PMI蛋白为42 ku。对转manA基因的拟南芥进行PCR分析表明,manA基因已稳定整合到拟南芥基因组中。氯酚红显色反应证实,整合到拟南芥基因组中的manA基因能表达具有6-磷酸甘露糖异构酶活性的PMI蛋白。这些结果说明,克隆的manA基因可在细菌和高等植物中高效表达。
【关键词】manA基因 6-磷酸甘露糖异构酶活性 细菌诱导表达 拟南芥转化
【基金】国家自然科学基金(304709291,30530510); 转基因植物专项(JY04-A-01); 教育部博士点基金资助
【所属期刊栏目】华中农业大学学报
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