山羊表皮干细胞的分离培养及EGFP基因转染研究
2006-08-25分类号:Q813.11;Q78
【部门】西北农林科技大学陕西省国家干细胞工程技术研究中心 西北农林科技大学陕西省国家干细胞工程技术研究中心 西北农林科技大学陕西省国家干细胞工程技术研究中心 陕西杨凌712100 陕西杨凌712100 陕西杨凌712100
【摘要】采用组织块法和酶消化法对山羊表皮干细胞进行分离,对分离的表皮干细胞进行了免疫组化染色鉴定,并对其进行了增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因转染研究。结果表明,2种方法均能得到山羊表皮干细胞,其中组织块培养法简单易行,组织块可重复利用,但原代细胞脱出时间较长,平均为8 d,且培养季节对细胞脱出时间、原代传代时间、传代数有显著影响;酶消化法周期短,8 d左右即可传代,不同培养季节对细胞克隆形成时间、细胞传代时间和传代数无显著影响,但处理过程繁琐。EGFP基因在转染表皮干细胞24 h后大量表达,转染率达20%~30%,72 h时转染强度最大,荧光可持续5周;转染使细胞增殖能力明显下降。
【关键词】绿色荧光蛋白 山羊 表皮干细胞 转染
【基金】国家“863”高技术研究与发展计划项目(2002AA216161); 教育部重大项目(03160)
【所属期刊栏目】西北农林科技大学学报(自然科学版)
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