含NDV F48E9株F基因的MDV CVI988株转移质粒载体的真核表达
2006-05-25分类号:Q78;S852.52
【部门】南京农业大学农业部畜禽疫病诊断与免疫重点开放实验室 南京农业大学农业部畜禽疫病诊断与免疫重点开放实验室 西北农林科技大学动物科技学院 南京农业大学农业部畜禽疫病诊断与免疫重点开放实验室 南京农业大学农业部畜禽疫病诊断与免疫重点开放实验室 南京农业大学农业部畜禽疫病诊断与免疫重点开放实验室 江苏南京210095 江苏南京210095 陕西杨凌712100 江苏南京210095 江苏南京210095 江苏南京210095
【摘要】为进一步提高重组病毒的表达水平,用构建的含gB启动子和NDV F48E9株F基因的MDV CVI988株转移质粒载体pUS10F转染293T细胞,通过PCR和接免疫荧光(IFA)法研究了其在真核中的表达,并确定最佳的转染条件。结果表明,真核细胞中带有F基因,转移质粒载体已经进入细胞DNA;转染转移质粒载体 pUS10F后的293 T细胞所表达的NDV F基因产物抗原性较好,能够与抗NDV的标准血清反应。确定的最佳转染条件为:DNA 3μg/mL,转染后48 h外源基因在细胞中的表达量最高,在6孔板和96孔板中细胞数量分别以 2×105/孔和1×101/孔的转染效果最好。
【关键词】畜禽疫病 新城疫病毒 F基因 马立克氏病病毒CVI988转移质粒载体
【基金】
【所属期刊栏目】西北农林科技大学学报(自然科学版)
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