克隆猪主要组织相容性复合体Ⅱ类DR基因座α链和β链及其体外复合体的构建
2006-06-30分类号：Q78
【部门】中国农业大学动物医学院 中国农业大学动物医学院 中国农业大学动物医学院 中国农业大学动物医学院 中国人民武装警察部队学院消防工程系 中国农业大学动物医学院 中国农业大学动物医学院 中国农业大学动物医学院 北京100094 大连大学生物工程学院 辽宁大连116622 北京100094 北京100094 北京100094 河北廊坊065000 北京100094 北京100094 北京100094
【摘要】为推动猪主要组织相容性复合体(MHC)空间构象的研究,体外构建了猪的MHC-Ⅱ类蛋白复合体(SLA-Ⅱ)。首先克隆长白-达兰杂交商品猪DRA和DRB基因,用富含甘氨酸-丝氨酸的Linker(G4S)3连接DRA和DRB的胞外区,用SOE-PCR得到复合体基因DRA-linker-DRB,插入原核表达载体进行表达;对表达的融合蛋白进行Western-blot鉴定、纯化、蛋白酶切割并对切割后的蛋白进行分离和纯化。对分离的目的蛋白、融合蛋白及麦芽糖结合蛋白(MBP)进行二级结构测定。得到83.4 ku的可溶性融合蛋白MBP-DRA-(G4S)3-DRB,其Western杂交带与表达条带大小一致。切割...
【关键词】猪 主要组织相容性复合体 基因座 二级结构
【基金】国家自然科学基金资助项目(30371098)
【所属期刊栏目】中国农业大学学报
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