海带雄性配子体差异表达基因片段的克隆及筛选
2005-10-30分类号：S917.3
【部门】农业部水产种质资源与养殖生态重点开放实验室上海水产大学生命科学与技术学院 农业部水产种质资源与养殖生态重点开放实验室上海水产大学生命科学与技术学院 农业部水产种质资源与养殖生态重点开放实验室上海水产大学生命科学与技术学院 上海200090 上海200090 上海200090
【摘要】利用抑制消减杂交法(suppression subtractive hybridization,SSH)获得了海带雌、雄配子体差异表达的cDNA片段,将雄配子体差异表达的cDNA片段克隆于pGEM-T载体并转化大肠杆菌(Escherichia coli)JM109,构建雄配子体差异表达的cDNA消减文库。自750个阳性克隆中随机挑选100个进行PCR扩增鉴定,电泳图谱表明插入片段大小在200~1000bp之间。进一步经过Southern斑点杂交筛选后,选取10个阳性克隆进行测序和序列分析,有7个片段与GenBank数据库中已知基因序列无明显同源性,初步判断为新的基因序列,3个片段与已知Fcp基...
【关键词】海带 差异表达基因 抑制消减杂交 cDNA消减文库 雄配子体
【基金】国家自然科学基金(39800105,30471328); 上海市教育委员会重点研究项目(04KA02); 上海水产大学校长专项基金
【所属期刊栏目】水产学报
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