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猪瘟病毒E2蛋白A/D抗原域在毕赤酵母中的表达

2005-03-25分类号:S852.651

【作者】徐学清  曹瑞兵  蔡梅红  任雪枫  周斌  陈溥言
【部门】南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室  南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室  南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室  南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室  南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室  南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室 江苏南京210095   江苏南京210095   江苏南京210095   江苏南京210095   江苏南京210095   江苏南京210095
【摘要】 对含猪瘟病毒E2蛋白A/D抗原区基因插入的重组酵母菌株进行诱导表达,通过对诱导时间、重组酵母菌株、菌体密度、培养液pH、甲醇剂量等培养条件与表达产量关系的分析,对重组蛋白的表达条件进行了优化。优化后的条件为:28~30℃,225r/min振荡培养至BMGY中菌体OD600值为3.0~3.5时,将菌体转入相当于4倍体积BMGY,pH为6.0的BMMY培养基中培养72h,每24h加入甲醇至终浓度为总体积的0.5%~1.0%。在此优化条件下,重组蛋白的表达量可达275.38μg/mL,比较温度对重组蛋白降解率的影响后发现,培养物上清液应保存于-20℃。
【关键词】巴斯德毕赤酵母  猪瘟病毒E2蛋白  A/D抗原区  表达条件  条件优化
【基金】国家863高技术发展计划项目(2001AA249012)
【所属期刊栏目】西北农林科技大学学报(自然科学版)
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