噬菌体抗体库的构建及抗猪脂肪细胞膜单抗的筛选
2005-06-10分类号：S852.4
【部门】中国农业科学院畜牧研究所 山东农业大学动物科技学院 山东农业大学动物科技学院 中国农业大学农业生物技术国家重点实验室 山东农业大学动物科技学院 北京100094 中国农业大学农业生物技术国家重点实验室 北京100094 泰安271018 泰安271018 北京100094 泰安271018
【摘要】用猪脂肪细胞以免疫删减法免疫小鼠,取其脾细胞,RT-PCR扩增抗体重链可变区(VH)和轻链可变区(VL)基因,克隆入噬菌粒表达载体pCANTAB5E中,构建单链抗体(ScFv)文库。用猪脂肪细胞,对其进行3轮吸附-洗脱-富集,筛选抗猪脂肪细胞膜单抗。经ELISA检测,51/96克隆具有与猪脂肪细胞结合活性,阳性率为53%,与猪肝细胞则成阴性反应,初步证明了单抗的特异性,为猪脂肪细胞膜单抗的制备提供了一种新的方法。
【关键词】单链抗体 噬菌体抗体库技术 猪脂肪细胞
【基金】国家自然科学基金资助项目(30070543); 北京市自然科学基金资助项目(5032012)
【所属期刊栏目】中国农业科学
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