甘蓝型油菜pep基因片段的克隆和种子特异性反义表达载体的构建
2005-06-30分类号：S565.4
【部门】国家杂交水稻工程技术研究中心 国家杂交水稻工程技术研究中心 湖南农业大学期刊社 作物基因工程湖南省重点实验室 作物基因工程湖南省重点实验室 作物基因工程湖南省重点实验室 湖南长沙410125 作物基因工程湖南省重点实验室 湖南长沙410128 湖南长沙410125 作物基因工程湖南省重点实验室 湖南长沙410128 湖南长沙410128 湖南长沙410128 湖南长沙410128 湖南长沙410128
【摘要】丙酮酸羧化酶(PEP)是控制油菜蛋白质/油脂含量比例的一个关键酶,抑制种子中pepc基因的表达,使其底物(丙酮酸)更多地朝生成油脂的方向流动,对提高种子的含油量,增加油菜的经济价值具有重要的意义.利用PCR技术从甘蓝型油菜湘油15号基因组中扩增了PEP基因片段,并将其克隆到pGEM-TEasy载体上进行测序.测序结果表明:扩增片段长576bp,与Yannai报道的PEP基因相应区域的同源性为95%.用扩增引物上设计的BamHI和SacI两位点酶将PEP基因片段切下,反向插入到pBI121.N质粒的Napin启动子之后,构建了种子特异性反义PEP表达载体,并通过农杆菌介导法将反义PEP基因转化到...
【关键词】甘蓝型油菜 PCR 反义PEP 种子特异性表达载体
【基金】国家“863”计划资助项目(国家生字1997-185)
【所属期刊栏目】湖南农业大学学报(自然科学版)
文献传递
