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鲮鱼DAF和DNA谱带的快速银染检测

2005-06-30分类号:Q953

【作者】郑光明  朱新平  刘毅辉  罗建仁
【部门】中国水产科学研究院珠江水产研究所 中国水产科学研究院热带亚热带鱼类选育与养殖重点实验室  中国水产科学研究院珠江水产研究所 中国水产科学研究院热带亚热带鱼类选育与养殖重点实验室  中国水产科学研究院珠江水产研究所 中国水产科学研究院热带亚热带鱼类选育与养殖重点实验室  中国水产科学研究院珠江水产研究所 中国水产科学研究院热带亚热带鱼类选育与养殖重点实验室 广东广州510380   广东广州510380   广东广州510380   广东广州510380
【摘要】利用20个高GC含量的8bp的随机引物开展野生鲮鱼(Cirrhinamolitorella)DNA扩增指纹的研究,以建立鲮鱼DNA扩增指纹(DAF)技术,包括引物设计,PCR反应条件的设置。结果显示,DAF引物浓度相对较高,最佳引物浓度为3 5μmol/L。DAF引物pn 16(GCGACCTG)扩增表明,DAF有好的重复性,引物pn-16扩增特征性谱带可用于鉴定鲮鱼。DAF扩增产物可揭示鲮DNA的多态性。同时建立了DNA尿素-聚丙烯酰胺凝胶银染快速检测技术和最佳银染参数,银染检测大约需要1h,建立包括固定、漂洗、染色、显色、停显色的银染程序和尿素-聚丙烯酰胺凝胶湿法与干法的保存方法。
【关键词】鲮  DNA扩增指纹  银染
【基金】国家自然科学面上基金(30271022); 广东省自然科学基金(001159).
【所属期刊栏目】中国水产科学
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