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应用nested和touch down PCR技术分离牦牛CAPN1大亚基基因EST

2005-02-25分类号:Q785

【作者】蔡欣  吴建平  徐明旭  张利平  汪虹英  刘雅楠
【部门】西北农林科技大学生命科学学院  甘肃农业大学动物科技学院  北京大学人类疾病基因研究中心  甘肃农业大学动物科技学院  甘肃省漳县第一中学  北京大学人类疾病基因研究中心 陕西杨凌712100   甘肃兰州730070   北京100083   甘肃兰州730070   甘肃漳县748300   北京100083
【摘要】 钙激活中性蛋白酶1(CAPN1)基因是影响肉嫩度的侯选基因。根据GeneBank中已公布的CAPN1基因cDNA序列设计同源PCR引物,通过RT,nested和touch-downPCR技术从牦牛肌肉组织总RNA中分离目的序列,与pGEM-T-easy载体连接后转化DH5α感受态菌株,通过PCR扩增、限制性酶切和测序分析鉴定阳性克隆。分离到的基因片段为牦牛CAPN1大亚基的部分编码序列,在GeneBank中的注册号为AY197555,与奶牛、人、食蟹猴、小鼠、绵羊以及大鼠相应序列的同源性分别为98%,89%,89%,83%,96%和81%,在不同物种之间具有较强的保守性。CAPN1基因EST...
【关键词】nested和touch-downPCR  EST分离  CAPN1大亚基基因  牦牛
【基金】教育部科学技术研究重点项目(03130)
【所属期刊栏目】西北农林科技大学学报(自然科学版)
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